研究從當(dāng)?shù)匾粋€(gè)招募了97只狗狗作為研究對(duì)象。這些狗狗年齡在1-8歲之間，平均年齡3.5歲，包括49只雌性和48只雄性，40只小型犬和57只中型/大型犬。

五種約束方法

研究采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，根據(jù)年齡、性別和體型進(jìn)行平衡，將狗狗隨機(jī)分配到五種處理組之一：

1. 被動(dòng)約束：將手放在狗狗肩上，拇指輕輕環(huán)繞在松緊適中的牽引繩上，允許狗狗身體和四肢有一定程度的活動(dòng)。

2. 口鼻約束：操作者站在狗狗身后，用雙手握住狗狗的口鼻部使其閉合，肘部靠在狗狗肩上，身體前傾輕輕將頭靠在狗狗頭后部以防過(guò)度移動(dòng)。

3. 籃式口套：使用籃式口套配合被動(dòng)約束。這種口套允許狗狗在口套內(nèi)有部分口腔活動(dòng)（如張嘴喘氣和舔嘴唇），因?yàn)榭谔妆旧聿唤佑|狗狗的口鼻部，但限制了狗狗張口的程度。

4. 軟布口套：使用軟布口套配合被動(dòng)約束。這種由織物材料制成的口套尺寸適合每只狗狗的口鼻部，允許舔嘴唇和輕微喘氣，但不允許WQ張開嘴巴。

5. 全身約束：操作者讓狗狗側(cè)臥，雙手握住狗狗的所有四肢，肘部靠在狗狗身上。對(duì)于小型犬，由一人完成；對(duì)于中型/大型犬，由兩人執(zhí)行，一人負(fù)責(zé)前腿，一人負(fù)責(zé)后腿。

研究流程

研究一個(gè)狗狗不熟悉的房間進(jìn)行，數(shù)據(jù)收集包括三個(gè)階段：

階段一：人類接近測(cè)試：為評(píng)估狗狗對(duì)陌生操作者的初始反應(yīng)，引導(dǎo)員將狗狗帶到指定位置后放下牽引繩，給狗狗兩分鐘時(shí)間接近陌生的操作者。如果狗狗接近且操作者能撫摸它三次，則被視為“愿意接近"。若任一條件未滿足，則認(rèn)為該狗狗“不愿意接近"。

第二階段：兩分鐘檢查：經(jīng)過(guò)一分鐘適應(yīng)期后，操作者將狗狗引導(dǎo)到房間的防滑墊上，并將其置于隨機(jī)分配的五種約束方法之一。檢查人員開始計(jì)時(shí)并執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)化檢查程序。

第三階段：30秒處理后觀察：檢查結(jié)束后，操作者和檢查員離開防滑墊，在房間角落靜靜站立。觀察狗狗30秒內(nèi)的行為，允許狗狗自由離開防滑墊或在房間內(nèi)自由活動(dòng)。

數(shù)據(jù)收集與分析

研究使用四個(gè)攝像機(jī)連續(xù)記錄整個(gè)過(guò)程，并使用諾達(dá)思的行為觀察記錄分析系統(tǒng)(The Observer XT)評(píng)估行為。利用先前研究開發(fā)的動(dòng)物行為譜對(duì)2分鐘檢查和30秒的處理后觀察期間使用連續(xù)采樣進(jìn)行評(píng)分（表1）。用先前開發(fā)的量表為每只狗分配了恐懼評(píng)分。恐懼評(píng)分采用5分制（0=無(wú)恐懼，4=極度恐懼），基于身體姿勢(shì)、回避/逃跑行為以及細(xì)微行為的表現(xiàn)進(jìn)行評(píng)估。